Purificação de Proteína verde fluorescente por meio de Cromatografia de Afinidade com Íon Metal Imobilizado (IMAC) e sua relevância para estudantes de Ciências Biomédicas durante aulas de Bioquímica na Universidade La Trobe – Austrália

Autores

  • Alex Jose José de Melo Silva La Trobe University
  • Lumar Lucena Alves Universidade de Tiradentes - Aracajú-SE
  • Julian Pakay La Trobe University

DOI:

https://doi.org/10.16923/reb.v14i3.638

Palavras-chave:

GFP, Purificação, IMAC

Resumo

Este trabalho foi realizado como prática integrada da disciplina de Bioquímica no curso de graduação em Ciências Biomédicas, objetivando demonstrar técnicas utilizadas para a purificação da Proteina Fluorescente Verde (GFP).  Para realização dos experimentos foi utilizada como metodologia principal a Cromatografia de Afinidade por Metal Imobilizado (IMAC). A região de abertura para alongamento da GFP foi subclonada dentro de um vetor de expressão chamado pQE30. A produção subsequente da proteína marcada com hexahistidina na região N-terminal, facilitou sua purificação pela IMAC. Uma purificação de aproximadamente três vezes mais que a esperada da GFP foi obtida. Dessa forma, os estudantes completaram o curso adquirindo significante experiência em relação às técnicas fundamentais na área molecular relacionadas à clonagem e princípios de expressão e purificação de proteínas recombinantes.

Biografia do Autor

Alex Jose José de Melo Silva, La Trobe University

Departamento de Bioquimica, Bioquimica e Biologia Molecular

Lumar Lucena Alves, Universidade de Tiradentes - Aracajú-SE

Departamento de Bioquimica. Bioquimica e Biologia Molecular

Julian Pakay, La Trobe University

Departamento de Bioquimica. Bioquimica e Biologia Molecular

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Publicado

15-12-2016

Como Citar

de Melo Silva, A. J. J., Alves, L. L., & Pakay, J. (2016). Purificação de Proteína verde fluorescente por meio de Cromatografia de Afinidade com Íon Metal Imobilizado (IMAC) e sua relevância para estudantes de Ciências Biomédicas durante aulas de Bioquímica na Universidade La Trobe – Austrália. Revista De Ensino De Bioquímica, 14(3), 34–35. https://doi.org/10.16923/reb.v14i3.638

Edição

Seção

Inovações educacionais